कार्यक्षम लॅब ऑटोमेशन सूचनांसाठी ओपनट्रॉन्स OT-2 वर्कस्टेशन्स

पत्रक तयार करा
मोजमाप आणि सांख्यिकीय विश्लेषण

लेखक केनेडी बे, पीएच.डी. आणि किन्नरी वॉटसन, पीएच.डी.

प्रारंभ करणे

पाठ योजना शिकवण्यापूर्वी, वर्गापूर्वी खालील चरण पूर्ण करा.

OT-2 अनबॉक्स करा
Opentrons ॲप सेट करा
पिपेट्स जोडा
डेक कॅलिब्रेट करा
टिप लांबी आणि विंदुक ऑफसेट कॅलिब्रेट करा
ॲपवर कोणतेही संबंधित प्रोटोकॉल इंपोर्ट करा
चाचणी OT-2 वर प्रोटोकॉल चालवा

अतिरिक्त समर्थन आवश्यक आहे?

तांत्रिक समर्थनासाठी, कृपया आमचे तपासा ओपनट्रॉन्स मदत केंद्र संबंधित लेखांसाठी. तुम्हाला आणखी समर्थन हवे असल्यास, कृपया संपर्क साधा support@opentrons.com.

तुम्हाला धडा योजनेशी संबंधित प्रश्न असल्यास, कृपया लेखकांशी संपर्क साधा, Kennedy Bae, येथे kennedy@opentrons.com, किंवा किन्नरी वॉटसन, येथे kinnari@opentrons.com.

शिक्षक मार्गदर्शक
मोजमाप आणि सांख्यिकीय विश्लेषण

लेखक केनेडी बे, पीएच.डी. आणि किन्नरी वॉटसन, पीएच.डी.

उद्देश

या प्रयोगशाळेचे उद्दिष्ट विद्यार्थ्यांमध्ये मानक वक्र तयार करण्यासाठी अनुक्रमिक डायल्युशन वापरणे आणि इंटरपोलेटिंगसाठी मानक वक्र वापरणे याविषयी समज विकसित करणे आहे.ample मूल्ये. यामध्ये प्रशंसा समाविष्ट आहे:

• मूलभूत पाइपिंग कौशल्ये
• सिरीयल dilutions
• मापन प्रतिकृती
• मानक वक्र श्रेणी
• महत्त्वाचे मूल्यांकन करण्यासाठी आकडेवारीचा वापर

विद्यार्थी स्वयंचलित द्रव हाताळणीच्या समांतर मॅन्युअल पाइपिंग करतात, ज्यामुळे विद्यार्थ्यांना दोन्ही तंत्रांची ताकद आणि संधी पाहता येतात.

विद्यार्थी प्रेक्षक

ही प्रयोगशाळा मध्य-स्तरीय अंडरग्रेजुएट बायोलॉजी अभ्यासक्रमांच्या प्रवेशासाठी वापरण्यासाठी तयार करण्यात आली होती. वर्गात नोंदणी केलेल्या कितीही विद्यार्थ्यांना सामावून घेणे लवचिक आहे.

पार्श्वभूमीचे ज्ञान

विद्यार्थ्यांना पाइपिंग, स्पेक्ट्रोफोटोमेट्री, मानक वक्र आणि सांख्यिकीय विश्लेषणाची वैचारिक समज असणे आवश्यक आहे.

मुख्य क्षमता

प्रयोगशाळा कौशल्ये
पिपेटिंग, एसample तयारी, आणि प्रयोगशाळा ऑटोमेशन उपकरणे वापर

डेटा विश्लेषण
मानक वक्र, इंटरपोलेशन आणि सांख्यिकीय विश्लेषण विकसित करणे

क्रिटिकल थिंकिंग
प्रायोगिक डेटाचे स्पष्टीकरण, समस्यानिवारण आणि वाजवी निष्कर्ष काढणे

पुरवठा

ओपनट्रॉन्स प्रोटोकॉल

वरून प्रोटोकॉल डाउनलोड करा
https://protocols.opentrons.com/protocol/customizable_s erial_dilution_ot2

• वर खालील पॅरामीटर्स निवडा webआपल्या सेटअप आणि पुरवठ्यानुसार पृष्ठ:
  • पिपेट प्रकार
  • माउंट साइड
  • टीप प्रकार
  • कुंड प्रकार
  • प्लेट प्रकार
• यासाठी डीफॉल्ट सेटिंग्ज ठेवा:
  • सौम्यता घटक (3)
  • पातळ पदार्थांची संख्या (१०)
  • एकूण मिक्सिंग व्हॉल्यूम (150)
  • वेल प्लेटमध्ये रिक्त (होय)
  • टीप वापरण्याचे धोरण (एक टीप वापरा)
  • हवेतील अंतराचे प्रमाण (१०)

ओपनट्रॉन्स उपकरणे

ओपनट्रॉन्स OT-2 ऑटोमेटेड लिक्विड हँडलिंग रोबोट
ओपनट्रॉन्स p300 8-चॅनेल विंदुक

नॉन-ओपनट्रॉन्स उपकरणे

प्लेट-आधारित स्पेक्ट्रोफोटोमीटर
डेटा विश्लेषणासाठी सॉफ्टवेअर (उदा. एक्सेल किंवा समर्पित आकडेवारी सॉफ्टवेअर)
P1000 व्हेरिएबल व्हॉल्यूम मॅन्युअल पिपेट्स (प्रति विद्यार्थी एक)
P100 व्हेरिएबल व्हॉल्यूम मॅन्युअल पिपेट (भाग A दाखवण्यासाठी फक्त एक आवश्यक आहे)

लॅबवेअर

ओपनट्रॉन्स 300 μL टिप रॅक
12-विहीर कुंड
96-वेल फ्लॅट बॉटम प्लेट
चाचणी ट्यूब (प्रति विद्यार्थी 6)
ड्रॉपर (प्रति विद्यार्थी 1)

अभिकर्मक

प्रति विद्यार्थी 1000 mL diH20
FD&C ब्लू क्रमांक 1 (या लॅबच्या विकासासाठी McCormick® चा वापर करण्यात आला)

प्रायोगिक कालावधी

आवश्यक वर्ग सत्रे
1

लॅब रन वेळ
अंदाजे एकूण वेळ: 2.5-3 तास
परिचय आणि कॅलिब्रेशन वक्र निर्मिती: 35 मिनिटे
Sample तयारी आणि पाइपिंग: 1 तास
डेटा संकलन: 30 मिनिटे

मूलभूत समस्यानिवारण

1. वर्गापूर्वी चाचणी चालवा; अशा प्रकारे विद्यार्थी येण्यापूर्वी कोणत्याही अनपेक्षित घटनांचे निराकरण केले जाऊ शकते.
2. टिप्स स्ट्राइकिंग प्लेट्सच्या समस्या जवळजवळ नेहमीच पर्यायी लॅबवेअर किंवा रोबोट कॅलिब्रेशन वापरल्यामुळे असतात. तुम्हाला याचा अनुभव येत असल्यास आणि योग्य लॅबवेअरची पुष्टी केली असल्यास, रोबोट पुन्हा कॅलिब्रेट करण्याचा प्रयत्न करा.
3. तुम्हाला ओपनट्रॉन्स सपोर्टशी संपर्क साधण्याची आवश्यकता असल्यास, कृपया त्यांना कळवा की तुम्ही आमच्या ओपनट्रॉन्स फॉर एज्युकेशन प्रोग्रामचा भाग आहात आणि तुमच्या पुढील लॅब वर्गाची तारीख.

आवश्यक पूर्व-लॅब क्रियाकलाप

ही लॅब सुरू करण्यापूर्वी, विद्यार्थ्यांना खालील तांत्रिक क्षमता आणि सैद्धांतिक ज्ञान असणे आवश्यक आहे:

• पिपेट टीप मॅन्युअल पिपेटवर लोड करा
• मॅन्युअल पिपेट्ससाठी व्हॉल्यूम समायोजन
• स्पेक्ट्रोफोटोमेट्रीचे सैद्धांतिक ज्ञान - या प्रयोगशाळेसाठी शिक्षक स्पेक्ट्रोफोटोमीटर चालवत असेल
• वक्र परिभाषित करणाऱ्या समीकरणाचे ज्ञान आणि मूल्ये प्रक्षेपित करण्याची क्षमता यासह मानक वक्रांचे आकलन
• मूलभूत सांख्यिकीय विश्लेषणाची मजबूत पकड, ज्यामध्ये गणना आणि अर्थ, मानक विचलन आणि R² समाविष्ट आहे

प्रक्रिया मार्गदर्शक

1. प्रयोगशाळा परिचय ~ 15 मिनिटे

तद्वतच, विद्यार्थ्यांनी वर्गात येण्यापूर्वी प्रयोगशाळेचे मार्गदर्शक वाचले पाहिजे, तथापि, पाईपिंग तंत्रांवर चर्चा करण्यासाठी 10 मिनिटे घालवण्याची योजना करा, पुन्हाview मानक वक्र, आणि इंटरपोलेटिंग s चेample मूल्ये.

2. कॅलिब्रेशन वक्र निर्मिती ~ 20 मिनिटे

पुढे, वर्गासाठी मानक वक्र निर्मिती (भाग A) दाखवा (ही प्रयोगशाळा असे गृहीत धरते की शिक्षक हा OT-2 रोबोट आणि स्पेक्ट्रोफोटोमीटरचा एकमेव ऑपरेटर असेल):

1. 50 μL ब्लू फूड डाई आणि 10 mL diH2O सह निळ्या रंगाचे द्रावण तयार करा.
2. 200-वेल सपाट तळाच्या प्लेटच्या A1-H1 विहिरीमध्ये 96 μL निळ्या रंगाचे द्रावण जोडा.
3. कुंड जलाशयाच्या A20 विहिरीत 1 मिली पाणी घाला.
   (टीप: शेवटच्या विघटनानंतरचा स्तंभ हे रिक्त स्थानांचे डीफॉल्ट स्थान आहे. कुंड/जलाशयाची शेवटची विहीर डीफॉल्ट द्रव कचरा आहे.)
4. खालीलप्रमाणे लॅबवेअरची व्यवस्था करा:
   a स्लॉट 1 = ओपनट्रॉन्स 300 μL टिप रॅक
   b स्लॉट 2 = 12-चॅनेल जलाशय
   c स्लॉट 3 = 96-विहीर सपाट तळाशी प्लेट
5. प्रोटोकॉल चालवण्यासाठी OT-2 रन ॲपवर जा.
6. 96 nm वर 450-वेल प्लेटचे शोषक प्रमाण मोजा.

3. चर्चा ~ 5 मिनिटे

सीरियल डायल्युशन्स चालवल्यानंतर आणि मानक वक्र तयार केल्यानंतर, तुम्ही वर्ग म्हणून एकत्र येऊन ऑटोमेशनच्या सामर्थ्य आणि संधींबद्दल चर्चा करू शकता.

4. भाग ब: मॅन्युअल एसample तयारी ~ 1 तास

लॅबच्या या भागादरम्यान, विद्यार्थ्यांना लॅबचा भाग बी स्वतंत्रपणे पूर्ण करण्यास सांगितले जाईल:

1. केंद्रित डाईचे 200 μL अलिकट गोळा करण्यासाठी एक चाचणी ट्यूब वापरा.
2. 4 mL diluent (diH2O) गोळा करण्यासाठी दुसरी टेस्ट ट्यूब वापरा.
3. पिपेट किमान 800 μL diH20 प्रत्येक 4 उर्वरित ट्यूबमध्ये. हे तुमचे एस होतीलampलेस
4. प्रत्येक s मध्ये केंद्रित डाईचे वेगवेगळे प्रमाण वितरीत करण्यासाठी ड्रॉपर वापराample ट्यूब.
5. पिपेट तुमच्या पहिल्या s च्या 200 μLampले 96-वेल प्लेटच्या विहिरीत. हे आणखी 3 वेळा पुन्हा करा म्हणजे तुमच्याकडे त्या s च्या 4 प्रतिकृती असतीलampप्लेट च्या 4 विहिरी मध्ये le. तुम्ही ही विहिरी कोणत्या विहिरीत ठेवल्या ते लिहाampले इन (तुम्ही तुमची 96-वेल प्लेट इतर विद्यार्थ्यांसोबत शेअर करत असाल - तुम्हाला कोणते हे जाणून घ्यायचे आहेampलेस तुमचे आहेत!).
6. आपल्या उर्वरित 3 सेकंदांसाठी वरील चरण पुन्हा कराampलेस आपण प्रत्येक एस च्या 4 विहिरी पाहिजेample, एकूण 16 विहिरींसाठी, 96-वेल प्लेटमध्ये भरले.
7. 96 nm वर 450-वेल प्लेटचे शोषक प्रमाण मोजा.

विद्यार्थी भाग B पूर्ण करत असताना, प्रश्नांची उत्तरे देण्यासाठी प्रयोगशाळेभोवती फिरण्याची योजना करा आणि विद्यार्थ्यांच्या पाइपिंग तंत्राचे निरीक्षण करा, विद्यार्थ्यांना ते कोणत्या विहिरी वापरत आहेत याची नोंद करण्याची आठवण करून द्या आणि आवश्यकतेनुसार वैयक्तिक मदत द्या.

5. डेटा संकलन ~ 30 मिनिटे

डेटा संकलनासाठी 30 मिनिटे द्या.

6. ब्रेकडाउन ~ 10 मिनिटे

प्रयोगशाळेच्या शेवटी लॅबच्या अहवालाची थोडक्यात ओळख करून देण्यासाठी आणि विद्यार्थ्यांना त्यांचे स्टेशन स्वच्छ करण्यासाठी आणि उर्वरित प्रश्न विचारण्यासाठी पुरेसा वेळ द्या.

प्रयोगशाळा अहवाल

सूचना

कॅलिब्रेशन वक्र डेटा, इंटरपोलेटेड एस यांचा समावेश असलेला सर्वसमावेशक प्रयोगशाळा अहवाल तयार करण्यासाठी विद्यार्थ्यांना नियुक्त कराample मूल्ये, आणि सांख्यिकीय विश्लेषण. अहवाल रचना आणि डेटा सादरीकरणासाठी मार्गदर्शक तत्त्वे प्रदान करा. अन्वेषणासाठी काही कल्पना खाली दिल्या आहेत.

• मानक वक्र स्थापित करा
  • तुमच्या मानकांसाठी वैयक्तिक मूल्ये एकत्रित करा.
  • प्रत्येकामध्ये सरासरी आणि मानक विचलन शोधा.
  • मानक वक्र परिभाषित करण्यासाठी सरासरी मूल्ये वापरा.
  • R2 मूल्याची गणना करून गणना केलेले वक्र डेटा पॉइंट्समध्ये किती चांगले बसते ते ठरवा. लक्षात ठेवा की डेटा पॉइंट्समध्ये उत्तम प्रकारे बसणाऱ्या रेषेचे R2 मूल्य 1 असते. प्रत्येक प्रयोगासाठी गणना केलेल्या R2 मूल्यासह नवीन मानक वक्र तयार करणे महत्त्वाचे आहे.
• एस चे इंटरपोलेशनampले मूल्ये
  • s इंटरपोलेट करण्यासाठी तुमची गणना केलेली मानक वक्र वापराample मूल्ये व्यक्तिचलितपणे.
  • तुमच्या प्रत्येक s च्या प्रतिकृतींमधील मानक विचलन काय आहेampलेस?
  • या फरकाची काही संभाव्य कारणे कोणती आहेत?
  • प्रतिकृती मोजण्याचे फायदे काय आहेत?
• s च्या वेगवेगळ्या संचांमध्ये तुम्ही कोणते ट्रेंड पाहू शकताampलेस? पाहिलेले कोणतेही फरक सांख्यिकीयदृष्ट्या महत्त्वपूर्ण आहेत का?
  • काही आउटलायर्स आहेत का? आकडेवारीचा वापर आऊटलायर्स वि चेरी पिकिंग डेटाच्या मूल्यांकनासाठी कसा अनुमती देतो?

विद्यार्थी मार्गदर्शक
मोजमाप आणि सांख्यिकीय विश्लेषण

उद्देश

ही प्रयोगशाळा तुमची मानक वक्र तयार करण्यासाठी अनुक्रमिक डायल्युशन वापरण्याची आणि इंटरपोलेटिंग s साठी मानक वक्र वापरण्याची समज विकसित करेल.ample मूल्ये. यामध्ये प्रशंसा समाविष्ट आहे:

• मूलभूत पाइपिंग कौशल्ये
• सिरीयल dilutions
• मापन प्रतिकृती
• मानक वक्र श्रेणी
• महत्त्वाचे मूल्यांकन करण्यासाठी आकडेवारीचा वापर

या लॅबमध्ये विद्यार्थी मॅन्युअल पाइपिंग तसेच OT-2 ऑटोमेटेड लिक्विड हँडलरद्वारे प्राप्त केलेला डेटा वापरतील, ज्यामुळे विद्यार्थ्यांना दोन्ही तंत्रांची ताकद आणि संधी पाहता येतील.

आवश्यक उपकरणे

• ओपनट्रॉन्स OT-2 ऑटोमेटेड लिक्विड हँडलिंग रोबोट
• ओपनट्रॉन्स p300 8-चॅनेल विंदुक
• ओपनट्रॉन्स 300 μL टिप रॅक
• मॅन्युअल पिपेट (P1000)
• 12-विहीर कुंड
• 96-वेल फ्लॅट बॉटम प्लेट
• 1000 एमएल विआयनीकृत पाणी (diH2O)
• FD&C ब्लू क्रमांक 1 (या लॅबच्या विकासासाठी McCormick® चा वापर करण्यात आला)
• 6 टेस्ट ट्यूब
• ड्रॉपर

प्रायोगिक प्रक्रिया

भाग अ: निरीक्षण करा मानक वक्र निर्मिती

OT-2 सीरियल डायल्युशनचे स्वयंचलित पाइपिंग करेल. जेव्हा तुमचे शिक्षक स्पेक्ट्रोफोटोमीटरने या मानकांचे मोजमाप करतात तेव्हा ते मानक वक्र तयार करण्यास सक्षम असतील.

तुमचा शिक्षक OT-2 रोबोट तयार करण्यासाठी आणि चालवण्यासाठी या सूचनांचे पालन करेल. स्वयंचलित OT-1 रोबोट पायऱ्या चालवण्यापूर्वी पायऱ्या 4-2 व्यक्तिचलितपणे पूर्ण केल्या जातील (तुमच्या शिक्षक किंवा विद्यार्थी स्वयंसेवकांद्वारे)

1. निळ्या रंगाचे द्रावण 50 μL ब्लू फूड डाई आणि 10 mL diH2O सह तयार करा.
2. 200-वेल सपाट तळाच्या प्लेटच्या A1-H1 विहिरीमध्ये 96 μL निळ्या रंगाचे द्रावण जोडा.
3. कुंड जलाशयाच्या A20 विहिरीला 1 मिली पाणी घाला.

(टीप: शेवटच्या विघटनानंतरचा स्तंभ हे रिक्त स्थानांचे डीफॉल्ट स्थान आहे. कुंड/जलाशयाची शेवटची विहीर डीफॉल्ट द्रव कचरा आहे.)

4. खालीलप्रमाणे लॅबवेअरची व्यवस्था करा:

स्लॉट 1 = ओपनट्रॉन्स 300 μL टिप रॅक
स्लॉट 2 = 12-चॅनेल जलाशय
स्लॉट 3 = 96-विहीर सपाट तळाशी प्लेट

5. ऑटोमेटेड प्रोटोकॉल चालवण्यासाठी OT-2 रन ॲपवर जा.

वरून प्रोटोकॉल डाउनलोड करा
https://protocols.opentrons.com/protocol/customiza ble_serial_dilution_ot2

• वर खालील पॅरामीटर्स निवडा webआपल्या सेटअप आणि पुरवठ्यानुसार पृष्ठ:
  • पिपेट प्रकार
  • माउंट साइड
  • टीप प्रकार
  • कुंड प्रकार
  • प्लेट प्रकार
• यासाठी डीफॉल्ट सेटिंग्ज ठेवा:
  • सौम्यता घटक (3)
  • पातळ पदार्थांची संख्या (१०)
  • एकूण मिक्सिंग व्हॉल्यूम (150)
  • वेल प्लेटमध्ये रिक्त (होय)
  • टीप वापरण्याचे धोरण (एक टीप वापरा)
  • हवेतील अंतराचे प्रमाण (१०)

6. 96 nm वर 450-वेल प्लेटचे शोषक प्रमाण मोजा.

टीप: सीरियल डायल्युशन्स एका मानकाच्या अलिकोट्सला क्रमशः डायल्युएंटच्या वाढत्या प्रमाणात स्थानांतरित करून केले जातात (आकृती पहा). OT-2 एकाग्र केलेल्या मानकांचा एक ॲस्पिरेट करेल आणि ते diluent मध्ये वितरीत करेल. ते नंतर द्रव वर आणि खाली वारंवार पाइपिंग करून केंद्रित रंग आणि सौम्यता मिसळेल. मग रोबोट पहिल्या मिश्रित मानकाचा ॲस्पिरेट करेल आणि ते डायल्युएंटच्या पुढील स्तंभात वितरीत करेल.

भाग ब: आचार मॅन्युअल एसample तयारी

1. केंद्रित डाईचे 200 μL अलिकट गोळा करण्यासाठी एक चाचणी ट्यूब वापरा.
2. 4 mL diluent (diH2O) गोळा करण्यासाठी दुसरी टेस्ट ट्यूब वापरा.
3. पिपेट किमान 800 μL diH20 प्रत्येक 4 उर्वरित ट्यूबमध्ये. हे तुमचे एस होतीलampलेस
4. विविध एस तयार करणेampभिन्न प्रमाणात एकाग्रता विरुद्ध diluent: ड्रॉपर वापरून एकाग्र रंगाच्या वेगवेगळ्या प्रमाणात प्रत्येक s मध्ये वितरीत कराample ट्यूब.
5. पिपेट तुमच्या पहिल्या s च्या 200 μLampले 96-वेल प्लेटच्या विहिरीत. हे आणखी 3 वेळा पुन्हा करा म्हणजे तुमच्याकडे त्या s च्या 4 प्रतिकृती असतीलampप्लेट च्या 4 विहिरी मध्ये le. तुम्ही ही विहिरी कोणत्या विहिरीत ठेवल्या ते लिहाample into (तुम्ही तुमची 96-वेल प्लेट इतर विद्यार्थ्यांसोबत शेअर करत असाल की तुम्हाला कोणते हे जाणून घ्यायचे आहेampलेस तुमचे आहेत!).
6. तुमच्या उर्वरित 5 सेकंदांसाठी 6 आणि 3 चरणांची पुनरावृत्ती कराamples, तर तुम्ही प्रत्येक s च्या 4 प्रतिकृतींसह समाप्त करालample 4 विहिरींमध्ये. आपण प्रत्येक एस च्या 4 विहिरी पाहिजेample, एकूण 16 विहिरींसाठी, 96-वेल प्लेटमध्ये भरले.
7. 96 nm वर 450-वेल प्लेटचे शोषक प्रमाण मोजा.

विद्यार्थी प्रश्नमंजुषा
मोजमाप आणि सांख्यिकीय विश्लेषण

विद्यार्थी प्रश्नमंजुषा

1. मानक वक्र तयार करण्यासाठी अनुक्रमांक डायल्युशन वापरण्याचा काय फायदा आहे?
2. जैविक मोजमापांमध्ये कॅलिब्रेशन वक्रांची निर्मिती महत्त्वाची का आहे?
3. कॅलिब्रेशन वक्र निर्माण करण्याच्या संभाव्य आव्हानाचे नाव द्या आणि त्यावर उपाय सुचवा.
4. या प्रयोगशाळेत वापरल्या जाणाऱ्या उपकरणांच्या भूमिकेचे वर्णन करा.
5. मॅन्युअल पाइपिंगमधून परिवर्तनशीलतेचे सामान्य स्त्रोत कोणते आहेत?
6. प्रत्येक s च्या प्रतिकृती मोजणे उपयुक्त का आहेampले?
7. s interpolating उद्देश काय आहेampया प्रयोगातील मूल्ये?
8. सांख्यिकीय विश्लेषण विविध s मध्ये फरक स्पष्ट करण्यात कशी मदत करू शकतेampलेस?
9. या प्रयोगशाळेतील निष्कर्ष जैविक संशोधनासाठी कसे संबंधित असू शकतात?

कागदपत्रे / संसाधने

कार्यक्षम लॅब ऑटोमेशनसाठी ओपनट्रॉन्स OT-2 वर्कस्टेशन्स [pdf] सूचना कार्यक्षम लॅब ऑटोमेशनसाठी OT-2 वर्कस्टेशन्स, OT-2, कार्यक्षम लॅब ऑटोमेशनसाठी वर्कस्टेशन्स, कार्यक्षम लॅब ऑटोमेशन, लॅब ऑटोमेशन, ऑटोमेशन

संदर्भ

• वापरकर्ता मॅन्युअल