ल्युसिड सायंटिफिक रेझिफर सेल्युलर ऑक्सिजन वापर दर देखरेख प्रणाली

तपशील

• उत्पादनाचे नाव: रेसिफर
• कार्य: सेल्युलर मेटाबोलिझमचे रिअल-टाइम सतत देखरेख विश्लेषण
• कमाल OCR (fmol/mm2/s) श्रेणी
  • व्हॉल्यूम (uL): ६५, कमाल OCR: २७५-३२५
  • व्हॉल्यूम (uL): ६५, कमाल OCR: २७५-३२५
  • व्हॉल्यूम (uL): ६५, कमाल OCR: २७५-३२५
  • व्हॉल्यूम (uL): ६५, कमाल OCR: २७५-३२५

हे छोटे मार्गदर्शक रेसिफर रिअल-टाइम सतत देखरेख विश्लेषण प्रयोग सुरू करण्यासाठी महत्त्वपूर्ण सल्ला आणि टिप्स प्रदान करते. रेसिफर प्रणाली मानक सेल कल्चर प्लेट्सना रिअल-टाइम चयापचय बदल जाणवणाऱ्या स्मार्ट हँड-हेल्ड रीडर्समध्ये रूपांतरित करून सेल्युलर मेटाबोलिझममधील तुमचे प्रयोग वाढवेल. तसेच, तपशीलवार सिस्टम आणि प्रायोगिक सेटअपसाठी संपूर्ण वापरकर्ता मार्गदर्शक पहा. ही "क्विक स्टार्ट मार्गदर्शक" आणि "पूर्ण वापरकर्ता मार्गदर्शक" खाली आढळते:

• सोप्या पद्धतीने सुरुवात करा
  तुमच्या पहिल्या प्रयोगासाठी, आम्ही एका साध्या पेशी घनता/बीजप्रयोगाने सुरुवात करण्याची शिफारस करतो. हे तुम्हाला रेझिफर सिस्टमशी परिचित होण्यास आणि पुढील उपचारांसाठी इष्टतम श्रेणीत बेसलाइन ओसीआर रीडिंग मिळविण्यासाठी प्रारंभिक परिस्थिती निश्चित करण्यास अनुमती देईल. उपचार प्रतिसाद अभ्यासांसाठी जिथे कल्चर डेन्सिटी समायोजित केली जाऊ शकते, आम्ही 30-100 fmols/mm2/s दरम्यान प्री-ट्रीटमेंट बेसलाइन स्थापित करण्याची शिफारस करतो.
• माध्यमे आणि उपचार हे इनक्यूबेटरच्या परिस्थितीशी पूर्व-संतुलित असले पाहिजेत.
  इष्टतम प्रारंभिक मापनासाठी माध्यम/उपचार हे इनक्यूबेटरच्या परिस्थितीशी पूर्व-संतुलित असले पाहिजेत (उदा., बदलापूर्वी 5% CO2, 37°C). माध्यमातील ऑक्सिजन वातावरण हे तापमान आणि आसपासच्या वातावरणाशी असलेल्या वायू समतोलावर खूप अवलंबून असते. उदा.ampसरासरी वातावरणीय परिस्थितीपासून सामान्य इनक्यूबेटर परिस्थितीत समतोल साधण्यासाठी १०० μL अव्यवस्थित माध्यमांना किमान १-२ तास लागतात. इतर वातावरण आणि इतर माध्यमांच्या आकारमानांसाठी (उदा.ampले, हायपोक्सिक चेंबर्स).
• प्रयोगापूर्वी रेसिफर (यूएसबी हँडहेल्ड डिव्हाइस) इनक्यूबेटरमध्ये १-२ तास बसू द्या, सेन्सर्स दिलेल्या ल्युसिड प्लेटवर खाली ठेवा.
  या तापमानवाढीच्या टप्प्याच्या बाहेर किंवा सक्रिय प्रयोगांदरम्यान रेसिफर इनक्यूबेटरमध्ये ठेवू नका. जेव्हा ते गरम होण्यापूर्वी किंवा वापरात नसताना, रेसिफर इनक्यूबेटरच्या बाहेर थंड, कोरड्या वातावरणात ठेवा. विहिरीच्या प्लेट्सवर सेन्सिंग झाकण ठेवण्यापूर्वी पेशींना विहिरीच्या तळाशी स्थिरावू देणे नेहमीच चांगले असते. हे सेन्सिंग प्रोबशी चुकून जोडण्यापासून पेशींना प्रतिबंधित करते.
• मीडिया व्हॉल्यूम
  मीडिया व्हॉल्यूमनुसार ओसीआर प्रसार-मर्यादित असू शकतो. मानक CO2 इनक्यूबेटरमध्ये देखील, पेशींची ओसीआर मागणी या मर्यादेपेक्षा जास्त असल्यास हायपोक्सिक परिस्थिती निर्माण होऊ शकते आणि सेल्युलर श्वसनात अपेक्षित वाढ दिसून येत नाही. सामान्य कल्चरसाठी, आम्ही 100 µL ने सुरुवात करण्याची शिफारस करतो. अत्यंत एरोबिक पेशी प्रकारांसाठी प्रसार-मर्यादित ओसीआर टाळण्यासाठी हे प्रमाण 65 µL पर्यंत कमी असणे आवश्यक असू शकते.

खंड (उल)	कमाल ओसीआर (fmol/mm2/s)
65	275-325
100	180-220
150	115-140
200	90-100

सेन्सिंग लिड्स आणि प्रोब लांबी
ल्युसिड वेगवेगळ्या प्लेट्स आणि वेगवेगळ्या प्रकारच्या सेल मॉडेल सिस्टमसाठी वेगवेगळ्या प्रोब लांबीची ऑफर देते (2D, 3D, ऑर्गनॉइड, टिश्यू, इ.) अधिक तपशीलांसह संपूर्ण टेबलसाठी, कृपया lucidsci.com/resources/documents ला भेट द्या: "रेसिफर व्हॅलिडेटेड 96-वेल प्लेट्स आणि सेन्सिंग लिड सिलेक्शन गाइड फॉर मोनोलेयर कल्चर." प्रायोगिक सेट-अप दरम्यान ल्युसिड लॅबमधील प्लेट सिलेक्शन ड्रॉपडाउनमध्ये योग्य प्लेट प्रकार सेट करणे आवश्यक आहे जेणेकरून डेटा अचूकपणे नोंदवला जाईल. इच्छित प्लेट दिसत नसल्यास, कृपया आमच्या सपोर्ट टीमशी येथे संपर्क साधा. support@lucidsci.com वर ईमेल करा तुमच्या प्रायोगिक सेटअपसाठी योग्य झाकण ओळखण्यासाठी.

• सेन्सिंग लिड्स ऑटोक्लेव्ह करू नका. हायड्रोजन पेरोक्साइड वापरू नका. प्लेट्स निर्जंतुक असतात आणि एकदा वापरण्यासाठी असतात.
• अनेक वापरांमुळे संवेदनक्षम साहित्य कालांतराने खराब होईल.
• सेन्सिंग झाकण थेट सूर्यप्रकाशापासून दूर ठेवा.

प्रायोगिक नियंत्रण म्हणून बाह्य विहिरी
नियंत्रणासाठी काठावरील विहिरींचा वापर केला जाऊ शकतो. यामुळे बाष्पीभवनामुळे महत्त्वाच्या डेटामध्ये व्यत्यय येण्याची शक्यता कमी होते.

बाष्पीभवन अपरिहार्य आहे
प्रयोगांदरम्यान माध्यम बाष्पीभवन कमी करण्यासाठी वापरात नसलेल्या विहिरींमध्ये पीबीएस जोडता येतो. जर तुमच्या इनक्यूबेटरमध्ये बाष्पीभवनाच्या समस्या असतील, तर कृपया इनक्यूबेटरच्या पाण्याच्या पॅनची पातळी नियमितपणे तपासा. आम्ही काही ९६-वेल प्लेट्सची पडताळणी केली आहे, ज्यामध्ये नंक™ एज™ ९६-वेल प्लेट आणि ग्रीनर चिमणी वेल ९६-वेल प्लेट्सचा समावेश आहे, ज्यामुळे बाष्पीभवन कमी होऊ शकते.

पेशींना त्यांचे काम करू द्या.
प्रयोगादरम्यान, व्यत्यय कमीत कमी करणे चांगले, उदा.ampले, इनक्यूबेटर उघडणे आणि बंद करणे. रेझिफर हे एक संवेदनशील उपकरण आहे जे लहान पर्यावरणीय बदलांना प्रतिसाद देते. जर तुम्हाला तुमच्या रेझिफरने चुंबक मिळाला नसेल तर कृपया आमच्याशी संपर्क साधा जेणेकरून तुम्ही एक प्रयोग करत आहात आणि दार उघडू नका हे इतरांना कळू शकेल.

अधिक माहितीसाठी कृपया lucidsci.com वरील कागदपत्रांखालील संपूर्ण वापरकर्ता मार्गदर्शक पहा.

प्रमुख ग्राहक प्रकाशने आणि प्रोटोकॉल
टॅन जे, व्हर्च्यू एस, नॉरिस डीएम, कॉनवे ओजे, यांग एम, बिडॉल्ट जी, ग्रिबेन सी, लुग्टू एफ, कामझोलास आय, क्रायसर जेआर, मिल्स आरजे, लियांग एल, परेरा सी, डेल एम, शुन-शिओन एएस, बेयर्ड एचजे, हॉर्सक्रॉफ्ट जेए, सॉटन एपी, मा एम, कॅरोबिओ एस, पेट्सलाकी ई, मरे एजे, गेर्शलिक डीसी, नाथन जेए, हडसन जेई, व्हॅलियर एल, फिशर-वेलमन केएच, फ्रेझा सी, विडाल-पुइग ए, फाझाकेर्ली डीजे. मानक पेशी संस्कृतीत मर्यादित ऑक्सिजनमुळे विभेदित पेशींचे चयापचय आणि कार्य बदलते. EMBO जे. २०२४ जून;४३(११):२१२७-२१६५. doi:
१०.१०३८/s४४३१८-०२४-०००८४-७. एपब २०२४ एप्रिल ५. पीएमआयडी: ३८५८०७७६; पीएमसीआयडी: पीएमसी१११४८१६८. क्लो टेसियर, मॅक्सिम टूजस, अँटोनियो सी. पॅगानो झोटोला, अँड्रियास बिकफाल्वी, थॉमस मॅथिवेट, थॉमस डौबोन, लुसी ब्रिसन, ऑड्रे बर्बन, अहमद शरणेक, रेसिफर सिस्टम वापरून ३डी-कल्चर्ड ब्रेन ट्यूमर स्टेम सेल्समध्ये माइटोकॉन्ड्रियल बायोएनर्जेटिक्सच्या रिअल-टाइम मापनासाठी प्रोटोकॉल, स्टार प्रोटोकॉल, खंड ६, अंक १,२०२५,१ ०३६५१, आयएसएसएन २६६६-१६६७.

हॅस डीटी, झांग क्यू, ऑटरसन जीए, ब्रायन आरए, एचurley JB, मिलर JML. मानवी RPE संस्कृतींमध्ये O2 उपलब्धता आणि चयापचय यावर मध्यम खोलीचा प्रभाव. नेत्ररोग विज्ञानाची गुंतवणूक करा. २०२३ नोव्हेंबर १;६४(१४):४. doi: १०.११६७/iovs.६४.१४.४. PMID: ३७९२२१५८; PMCID: PMC2023. ट्रायलो एम, खाचो एम. रेसिफर प्लॅटफॉर्म वापरून माऊस स्नायू पेशींमध्ये लाईव्ह-सेल, रिअल-टाइम, माइटोकॉन्ड्रियल श्वसनाचे निरीक्षण करण्यासाठी प्रोटोकॉल. STAR प्रोटोकॉल. २०२४ डिसेंबर २०;५(४):१०३३३०. doi: १०.१०१६/j.xpro.२०२४.१०३३३०. Epub २०२४ सप्टेंबर २०. PMID: ३९३०५४८६; PMCID: PMC1.

वारंवार विचारले जाणारे प्रश्न

प्रश्न: लाईव्ह-सेल मॉनिटरिंगसाठी रेसिफरचा वापर करता येईल का?
अ: हो, रेसिफर हे सेल्युलर मेटाबोलिझमचे रिअल-टाइम सतत निरीक्षण करण्यासाठी डिझाइन केलेले आहे, ज्यामध्ये लाईव्ह-सेल विश्लेषणाचा समावेश आहे.

प्रश्न: प्रयोगांदरम्यान बाष्पीभवनाच्या समस्या मी कशा सोडवल्या पाहिजेत?
अ: बाष्पीभवन कमी करण्यासाठी, वापरात नसलेल्या विहिरींमध्ये पीबीएस घाला आणि उत्पादन मॅन्युअलमध्ये शिफारस केलेल्या विशिष्ट विहिरी प्लेट्स वापरण्याचा विचार करा. बाष्पीभवन ही चिंताजनक बाब असल्यास इनक्यूबेटरच्या पाण्याच्या पॅनची पातळी नियमितपणे तपासा.

कागदपत्रे / संसाधने

ल्युसिड सायंटिफिक रेझिफर सेल्युलर ऑक्सिजन वापर दर देखरेख प्रणाली [pdf] वापरकर्ता मार्गदर्शक रेसिफर सेल्युलर ऑक्सिजन वापर दर देखरेख प्रणाली, रेसिफर, सेल्युलर ऑक्सिजन वापर दर देखरेख प्रणाली, वापर दर देखरेख प्रणाली, दर देखरेख प्रणाली, देखरेख प्रणाली

संदर्भ

• वापरकर्ता मॅन्युअल